發(fā)布日期：2025/06/11

以下是生化實(shí)驗(yàn)中常用試劑的分類及用途總結(jié)，結(jié)合實(shí)驗(yàn)安全與操作要點(diǎn)，供實(shí)驗(yàn)參考：

 一、基礎(chǔ)化學(xué)試劑  

  1. 酸堿類試劑  
    鹽酸（HCl）、氫氧化鈉（NaOH）    
      作用  ：調(diào)節(jié)溶液pH值，配制緩沖液。  
      應(yīng)用  ：細(xì)胞裂解液、酶反應(yīng)體系的pH調(diào)控。

 
    硫酸（H?SO?）、乙酸（CH?COOH）    
      作用  ：強(qiáng)酸/弱酸，用于沉淀蛋白、調(diào)節(jié)酸性環(huán)境。  
      應(yīng)用  ：蛋白質(zhì)變性實(shí)驗(yàn)、DNA提取中的酸性條件設(shè)置。  

  2. 鹽類試劑  
    氯化鈉（NaCl）    
      作用  ：維持滲透壓，促進(jìn)蛋白溶解或沉淀。  
      應(yīng)用  ：DNA提取中的鹽溶液（如TE緩沖液含NaCl）、細(xì)胞培養(yǎng)液。  

    氯化鉀（KCl）、氯化鎂（MgCl?）    
      作用  ：提供離子環(huán)境，激活酶（如Mg²?是DNA聚合酶的輔因子）。  
      應(yīng)用  ：PCR反應(yīng)體系、酶活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)。

  3. 有機(jī)溶劑  
    乙醇（Ethanol）、異丙醇（Isopropanol）    
      作用  ：沉淀核酸、蛋白，固定細(xì)胞，消毒。  
      應(yīng)用  ：DNA/RNA提取中的沉淀步驟、實(shí)驗(yàn)器材消毒。  

    丙酮（Acetone）、二甲亞砜（DMSO）    
      作用  ：溶解脂類、難溶性化合物（如DMSO溶解PCR引物）。  
      應(yīng)用  ：脂質(zhì)提取、細(xì)胞凍存液（DMSO作為凍存保護(hù)劑）。  

 二、生物大分子研究試劑  
  1. 核酸相關(guān)試劑  
    Tris HCl緩沖液    
      作用  ：維持核酸提取液的pH穩(wěn)定（通常pH 7.5 8.5）。  
      應(yīng)用  ：DNA/RNA提取試劑盒、質(zhì)粒純化。  

    乙二胺四乙酸（EDTA）    
      作用  ：螯合金屬離子，抑制核酸酶活性。  
      應(yīng)用  ：DNA保存液、細(xì)胞裂解液（如TE緩沖液含EDTA）。  

    十二烷基硫酸鈉（SDS）    
      作用  ：強(qiáng)去污劑，裂解細(xì)胞并變性蛋白。  
      應(yīng)用  ：DNA提取中的細(xì)胞裂解、SDS PAGE凝膠電泳（分離蛋白）。  

 

  2. 蛋白質(zhì)相關(guān)試劑  
     Tris HCl緩沖液（蛋白專用，pH 6.8 8.8）    
      作用  ：維持蛋白溶液的pH，防止變性。  
      應(yīng)用  ：蛋白提取、Western blot實(shí)驗(yàn)。  

    苯甲基磺酰氟（PMSF）    
      作用  ：絲氨酸蛋白酶抑制劑，防止蛋白降解。  
      應(yīng)用  ：蛋白提取過程中保護(hù)目標(biāo)蛋白。  

    考馬斯亮藍(lán)（Coomassie Brilliant Blue）    
      作用  ：與蛋白結(jié)合顯色，用于蛋白定量（Bradford法）或電泳染色。  
      應(yīng)用  ：蛋白濃度測(cè)定、SDS PAGE凝膠染色。  

 三、染色與檢測(cè)試劑  
  1. 核酸染色劑  
    溴化乙錠（EB）    
      作用  ：插入DNA雙鏈，紫外下顯熒光，用于電泳檢測(cè)核酸。  
      注意  ：強(qiáng)致癌物，現(xiàn)多被安全替代物（如SYBR Green、GoldView）取代。  

    甲基綠（Methyl Green）、派洛寧（Pyronin）    
      作用  ：分別染色DNA（綠色）和RNA（紅色），用于細(xì)胞內(nèi)核酸定位。  
      應(yīng)用  ：組織切片或細(xì)胞涂片的核酸染色。  

  2. 蛋白染色劑  
    麗春紅S（Ponceau S）    
      作用  ：可逆性染色蛋白，用于Western blot中轉(zhuǎn)膜效率驗(yàn)證。  
      應(yīng)用  ：膜上蛋白的快速可視化檢測(cè)。  

    銀染試劑（硝酸銀、甲醛等）    
      作用  ：高靈敏度染色蛋白，用于電泳后微量蛋白檢測(cè)。  
      應(yīng)用  ：雙向電泳（2 DE）后的蛋白圖譜分析。  

  3. 細(xì)胞活性檢測(cè)試劑  
    臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue）    
      作用  ：死細(xì)胞染色（活細(xì)胞拒染），用于細(xì)胞計(jì)數(shù)和存活率評(píng)估。  
      應(yīng)用  ：細(xì)胞培養(yǎng)中的 viability 檢測(cè)。  

    MTT試劑（3 (4,5 二甲基噻唑 2) 2,5 二苯基四氮唑溴鹽）    
      作用  ：檢測(cè)細(xì)胞代謝活性，活細(xì)胞線粒體酶將MTT還原為紫色甲臜。  
      應(yīng)用  ：細(xì)胞增殖或毒性實(shí)驗(yàn)（如藥物篩選）。  

 四、緩沖液與溶液  
  1. 常用緩沖液  
    磷酸鹽緩沖液（PBS，pH 7.2 7.4）    
      成分  ：NaCl、KCl、Na?HPO?、KH?PO?  
      作用  ：模擬生理滲透壓，維持pH穩(wěn)定，用于細(xì)胞洗滌、保存。  
      應(yīng)用  ：細(xì)胞培養(yǎng)、免疫組化實(shí)驗(yàn)。  

    Tris 鹽酸緩沖液（Tris HCl，pH 6.8 8.8）    
      作用  ：廣泛用于核酸和蛋白實(shí)驗(yàn)的pH緩沖。  
      應(yīng)用  ：DNA提取、SDS PAGE凝膠配制（分離膠pH 8.8，濃縮膠pH 6.8）。  

  2. 特殊用途溶液  
    TE緩沖液（Tris EDTA，pH 8.0）    
      作用  ：溶解并保存DNA，EDTA抑制核酸酶。  
      應(yīng)用  ：質(zhì)粒DNA、基因組DNA的長(zhǎng)期儲(chǔ)存。  

    TAE/TBE緩沖液（用于核酸電泳）    
      成分  ：Tris、乙酸/硼酸、EDTA  
      作用  ：提供電泳電場(chǎng)環(huán)境，EDTA抑制核酸酶。  
      應(yīng)用  ：瓊脂糖凝膠電泳分離DNA/RNA。  

 五、酶與輔酶類試劑  
    DNA聚合酶（如Taq酶、Pfu酶）    
      作用  ：催化DNA鏈合成，用于PCR擴(kuò)增。  
      應(yīng)用  ：基因克隆、突變檢測(cè)。  

    限制性內(nèi)切酶（如EcoRI、HindIII）    
      作用  ：識(shí)別并切割特定DNA序列，用于基因工程。  
      應(yīng)用  ：質(zhì)粒構(gòu)建、DNA酶切分析。  

    辣根過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶（AP）    
      作用  ：酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）或Western blot中的信號(hào)放大。  
      應(yīng)用  ：抗原 抗體反應(yīng)的顯色檢測(cè)（如DAB顯色）。  

 六、安全與防護(hù)注意事項(xiàng)  
1.   有毒試劑  ：如EB、PMSF、DMSO需在通風(fēng)櫥操作，佩戴手套和護(hù)目鏡。  
2.   易燃易爆試劑  ：乙醇、丙酮遠(yuǎn)離火源，密封保存。  
3.   強(qiáng)酸強(qiáng)堿  ：HCl、NaOH需小心操作，避免皮膚接觸，用后及時(shí)蓋緊瓶蓋。  
4.   生物危害  ：涉及病毒、細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)試劑需滅菌處理，按生物安全等級(jí)操作。